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【直播】【Inscopix研讨会】成像大脑:如何制造和使用新的基因编码荧光探针来监测神经递质活动

蔻享学术 2023-07-24

The following article is from 滔博生物 Author 研究员 滔滔





直播信息

报告题目

成像大脑:如何制造和使用新的基因编码荧光探针来监测神经递质活动

报告人(单位)

万金霞博士(北京大学生命科学学院)

报告时间

2022年3月16日(周三)22:00

主办方

滔博生物

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会议内容

神经之间的信息交流主要由神经递质化学信号驱动,并为无数的大脑功能提供基础,这些功能包括感觉知觉、运动活动和行为状态等。基因编码的动态荧光探针,如钙探针,是监测神经传递的有力工具。


在本次网络研讨会中,将探讨基因编码的基于G蛋白偶联受体激活依赖的(GRAB)神经递质探针的开发原理和策略。以GRAB5-HT探针为例,介绍了GRAB5-HT探针的发展、表征和应用。此外,您还将看到最新的GRAB探针套装(如单胺类、神经脂质、嘌呤和神经肽),该套装由北京大学李毓龙教授课题组开发,用于小鼠自由行为时监测神经递质和神经调质的动态变化,适用于多种成像技术,包括Inscopix显微成像。


使用nVista / nVoke / nVue系统在动物自由行为时监测和操纵多巴胺的释放

图 : 显示了分子水平荧光激发与新型多巴胺探针的示意图。该探针可以在Inscopix的显微成像中观察到绿色荧光


nVue 系统同时成像多巴胺探针和 GCaMP 神经元

图:同时成像多巴胺探针和 GCaMP 神经元


nVista 系统显微成像安非他命给药后的多巴胺活动

图:安非他命会增加背侧纹状体的多巴胺水平。(A) 安非他命给药后  GRABDA 介导的荧光变化。蓝色迹线为接受安非他命 (n= 6) 的小 鼠平均值,灰色迹线为接受生理盐水 (n=3) 的小鼠平均值。阴影表明 SEM。红框表示注入安非他命的时间。(B) 安非他命注射前和注 射后 15 分钟的成像示例。(C) 与注射前基线相比,生理盐水 ( 灰色 ) 和安非他命 ( 蓝色 ) 后的平均荧光值 (t 检验,*p<0.01)。


nVoke 系统对多巴胺释放的光遗传刺激

图 : 在光遗传刺激期间,成像多巴胺释放情况。(A)在其中一只小鼠上记录的光遗传刺激期间  GRABDA 介导的荧光变化。橙色标记表 示刺激时期。(B)实验中,如图 A 所示刺激时的荧光变化,橙色背景表示刺激周期,平均值(n=30)用蓝色线表示。(C)光遗传刺 激下的荧光峰值变化。没有注射 ChrimsonR 病毒的小鼠显示为灰色。黑质中有 ChrimsonR 表达的小鼠(显示为蓝色)有显著更高的 反应(t 检验 , *p<0.01)。蓝色条表示组平均,误差条代表 SEM(D)荧光响应对 OG-LED 辐照度的灵敏度。在其中一只小鼠上实验, 变化迹线表示荧光变化对各种 OG-LED 功率水平的响应。

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编辑:王媛媛

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